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酶聯免疫吸附試驗（ELISA）自問世以來，以其敏感性高，特異性強，操作簡便、安全，開創了免疫學科研的新紀元在科研方面得到了廣泛的應用。但是人ELISA試劑盒在它的研究、生產及使用中常常會碰到非特異性顯色問題，ELISA試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物，操作不當等因素都會導致這樣的結果。本文就在實驗過程中產生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特異性顯色作以分析。
       在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健一步，應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作，得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關，ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
    每種試劑都有其*反應模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應時間長，會造成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，人ELISA試劑盒反應板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發，板上應加蓋。